Les désinfectants utilisés dans un environnement respectueux des bonnes pratiques de fabrication (BPF) doivent être validés pour démontrer qu’ils peuvent réduire la charge biologique typique et anticipée à un niveau acceptable.

Les directives de la FDA sur le traitement aseptique des produits pharmaceutiques stériles industriels produit par AsepticProcessing - Bonnes pratiques de fabrication actuelles de septembre 2004 stipule : « Les désinfectants utilisés en routine doivent être efficaces contre la flore végétative microbienne normale récupérée dans l’usine de fabrication »¹.

De plus, l'Annexe 1 d'EudraLex Vol. 4 « Les règles régissant les produits pharmaceutiques dans l’Union européenne » d'août 2022 stipule : « 4.34 Le procédé de désinfection doit être validé. Les études de validation doivent démontrer la pertinence et l’efficacité des désinfectants de manière spécifique, en précisant les modalités d'utilisation et le type de surface, ou de matériau représentatif si cela est justifié, et les durées de péremption des solutions préparées².

En 2018, Life Sciences d’Ecolab a lancé son programme Validex™ d’efficacité des désinfectants. Le paquet de données Validex™ fournit une méthode de test claire et reproductible pour l’évaluation des désinfectants destinés à être utilisés dans les salles propres pharmaceutiques. Le programme est conçu pour garantir une méthode appropriée et des critères d’acceptation pour le secteur qui peuvent être utilisés à l’échelle mondiale. La méthode a ensuite été utilisée pour développer un ensemble complet de données utilisant la microflore et les surfaces pertinentes des salles propres.

L’approche Validex™ réduit la complexité et aide les fabricants de produits pharmaceutiques à améliorer leur efficacité grâce à des consignes spécifiques pour les procédures de validation des désinfectants pour salle propre.

La méthodologie Validex™ est basée sur les principes de la norme EN (European Norm) méthode EN 13697. Il s’agit d’un test quantitatif de surface non poreuse3 mis au point par le Comité Européen de Normalisation (CEN). Le comité technique 216 du CEN produit des normes harmonisées et des méthodes d’essai pour l’évaluation de l’efficacité des désinfectants et des antiseptiques.

Ces méthodes de « norme européenne » (EN) sont largement utilisées et acceptées en Europe et dans les pays membres de la Convention PIC/S pour la validation des désinfectants pour salles propres, mais ne sont pas spécifiquement conçues pour l’industrie pharmaceutique.

À titre d’exemple, la norme EN13697, la méthode de test couramment utilisée pour valider les désinfectants pour salles propres et qui est sans doute l’une des méthodologies les plus pertinentes, vise en fait à démontrer « l’activité des désinfectants chimiques utilisés dans les domaines alimentaire, industriel, domestique et institutionnel ». Ces types d’environnements présentent généralement des niveaux de souillures, de charge biologique et de microflore très différents de ceux habituellement rencontrés dans un environnement de salle propre.

En raison de l’absence d’une méthode de test spécifique conçue pour l’industrie pharmaceutique, la méthode Validex™ a été développée en tenant compte de ce besoin, en appliquant des paramètres adaptés à la validation des désinfectants en salle propre et les critères du chapitre 1072 de la pharmacopée américaine, « Désinfectants et antiseptiques » (USP<1072>)⁴. Le développement de Validex™ a également pris en compte les variations entre les différentes normes régionales, telles que les méthodes EN et AOAC/ASTM, et inclut la variation des souches d’organismes, des volumes de biocides et d’inoculum et de la taille de la surface d’essai. De plus amples informations sur le programme Validex™ sont disponibles dans l’article « Call for a global disinfectant standard » du numéro de novembre 2019 de Cleanroom Technolog^y5.

Bien qu’il existe une obligation réglementaire pour les utilisateurs finaux, qui doivent valider les désinfectants utilisés dans les salles propres, il n’existe aucune directive sur la méthodologie spécifique à utiliser. De nombreux utilisateurs finaux choisissent d’utiliser des versions modifiées des méthodes de la norme EN, car elles sont bien conçues et robustes. Ils optent également pour des critères d’acceptation qui reflètent les exigences de l’industrie pharmaceutique, tels que ceux donnés dans l’USP <1072>.

L’utilisation de normes modifiées pour les méthodes d’efficacité des désinfectants est une approche reconnue, largement acceptée par les organismes de réglementation. C’est cette même approche qui a été adoptée lors du développement du programme Validex™ d’Ecolab.

Suite à l’introduction de Validex™, et après 6 ans de mise en œuvre réussie dans divers secteurs des sciences de la vie, Ecolab a poursuivi le développement du paquet de données, pour inclure l’évaluation des lingettes désinfectantes.

L’intégration de l’action mécanique (essuyage) dans la méthode d’essai est importante, car les désinfectants utilisés en salle propre sont généralement appliqués à l’aide d'une serpillière a franges ou d'un chiffon. En 2015, une nouvelle méthode EN 16615 : Essai quantitatif pour les surfaces non poreuses avec action mécanique⁶, pour les lingettes utilisées dans le domaine médical, a été introduite pour démontrer l’efficacité des désinfectants et l’effet de l’action mécanique sur cette efficacité.

En août 2022, la nouvelle version d’EudraLex Vol.4 Annexe 1 a été publiée. Celle-ci demandait aux utilisateurs finaux de valider les désinfectants selon la manière spécifique dont ils sont utilisés. C’est pourquoi cette méthode est devenue un choix populaire pour la validation des désinfectants pour salles propres.

En 2020, la norme EN 16615 a été incluse dans l’Accord technique pour les biocides de l’Agence européenne des produits chimiques (ECHA) v2.2⁷ en tant que méthode recommandée pour les tests d’efficacité des désinfectants appliqués en pratique à l'aide d'une serpillière à franges ou de lingettes/chiffons. Malgré cela, la norme EN 16615 reste principalement conçue pour évaluer l’application à l'aide d'une serpillière à franges et utilise un poids d’application lourd normalisé (2,4 kg) pour imiter la pression appliquée lors de l’utilisation de cette technique. L’application de poids (pression) n’étant pas un facteur commun évalué dans l’évaluation de l’efficacité des lingettes biocides, la poursuite du développement de Validex™ pour évaluer le mouvement d'application d'une lingette s’est également penchée sur ce facteur. Les travaux de développement de la méthode ont révélé qu’une pression d’application plus forte augmentait le niveau de destruction microbienne observé. Pour cette raison, la méthode Validex™ a établi un poids plus léger et plus approprié pour refléter le passage manuel d'une lingette. Ceci permet d'utiliser la méthode à la fois pour l'application par serpillière à franges et par lingette.

Comme nous l’avons déjà mentionné, et à l'isntar d'autres normes EN, la norme EN 16615 n’est pas conçue spécifiquement pour l’industrie pharmaceutique. En conséquence, sa méthodologie standard intègre une charge biologique initiale élevée (inoculum de départ) et impose une application de la lingette selon un mouvement bidirectionnel. Bien que la norme EN 16615 puisse être considérée comme plus représentative de l’application de désinfectants dans le « monde réel », les techniques d’application des bonnes pratiques généralement utilisées dans l’environnement de salle propre ne sont pas intégrées dans sa méthodologie.

La nouvelle méthode de validation des désinfectants pour lingettes d’Ecolab est spécifiquement conçue pour l’environnement de la salle propre. La méthode d’utilisation des lingettes Validex™ intègre la technique d’application des bonnes pratiques pour salle propre (essuyage par chevauchement unidirectionnel). D’autres facteurs ont été évalués dans le cadre du développement de la méthode, conçue pour mieux représenter les techniques de salle propre, notamment le pliage, les couches, la pression et la saturation optimaux des lingettes. La méthode Ecolab a également été développée pour évaluer le retrait et le mouvement des organismes ainsi que leur destruction (réduction logarithmique).

En plus de l’évaluation de l’efficacité microbienne, il est important de prendre en compte la validité des méthodes de test. L’un des écueils courants qui peut entraîner une évaluation inefficace de l’efficacité est de ne pas démontrer comment certaines étapes d’une méthode d'essai peuvent avoir un impact sur la viabilité et la détection microbiennes. Sans validation de méthode, il n’est pas toujours possible de garantir que la réduction microbienne logarithmique détectée est due à la seule efficacité biocide ou à des étapes de la méthode d’essai qui pourraient influencer ce résultat.

À titre d’exemple, la plupart des méthodes d’essai, y compris les normes EN et Validex™, incluent une étape d’inoculation d’un organisme sur une surface qui est ensuite séchée avant l’application d’un biocide. Il est essentiel de comprendre l’impact de cette étape de séchage pour s’assurer qu’il reste suffisamment d’organismes viables sur la surface d’essai pour démontrer la réduction logarithmique souhaitée, mais aussi pour s’assurer que les organismes ne sont pas tués par ce seul procédé plutôt que par l’effet du désinfectant appliqué par la suite.

Le niveau d’inoculum de départ et les conditions de séchage ont été évalués et développés pour Validex™ afin de garantir la réalisation d’un essai valide et répétable. La validité de l'essai devra également inclure l’évaluation d’un neutralisant capable d’arrêter l’action biocide au-delà du temps de contact validé sans pour autant provoquer d’effet toxique pour l’organisme d’essai, autant de considérations prises en compte lors du développement de Validex™.

En combinant des études d’action non mécanique et d’action mécanique (passage de la lingette), le programme Validex™ fournit un ensemble complet de données, utilisant une grande variété de surfaces courantes de salle propre et de flore microbiologique, comme le résume la figure 1.0.